CGM - Département Dynamique et Stabilité des Génomes
Dynamique de la réplication de l’ADN chez les eucaryotes supérieurs
Responsable : Kathrin MARHEINEKE
MàJ : 01/02/12
Adresse
CNRS - Centre de Génétique Moléculaire - UPR 3404
Avenue de la Terrasse - Bât. 26
91198 GIF-SUR-YVETTE Cedex
FRANCE
Tél. : 33 (0)1 69 82 43 87
L'équipe
Pierre Libeau, Assistant-ingénieur
Kathrin Marheineke, Chargée de Recherche, CNRS
Pierre Priam, étudiant
Ilan Theurillat, étudiant
Raphaelle Trouslard, étudiante
Thématique
La réplication de l’ADN est un événement fondamental de la prolifération cellulaire. Chez les eucaryotes supérieurs, elle démarre depuis des milliers de sites appelés origines de réplication. Le positionnement et le moment d’activation des origines de réplication sont mal caractérisés.
Le programme spatio-temporel de la réplication change pendant le développement et la différentiation de la cellule. Pour protéger la stabilité génétique, il existe des voies de signalisation (checkpoint) dans la cellule qui détectent quand la réplication est perturbée par de l’ADN endommagé.
Nous utilisons le système modèle de Xénope (Xenopus laevis), qui permet d’étudier la réplication et ses voies de contrôle. Dans ce système in vitro les spermatozoïdes de Xénope sont répliqués dans des extraits d’œufs de manière très efficace.
Nous avons montré par le passé que les mêmes kinases du type « checkpoint » ATR/ATM sont impliquées en présence et en l'absence d’un stress réplicatif chez le Xénope.
Notre laboratoire s’intéresse à la question de savoir comment la régulation temporelle de la phase S s’effectue à la fois en dehors et pendant le stress réplicatif lorsque l’ADN est endommagé ou les fourches de la réplication sont arrêtées. Nous étudions aussi ces questions pendant le développement précoce du Xénope. Pour répondre à ces questions nous utilisons entre autres une technique qui permet d’étirer des fibres de l’ADN, le peignage moléculaire de l’ADN. Ceci permet de visualiser directement des origines de la réplication dessus des fibres d’ADN.
Le groupe s’est installé en septembre 2010 au CGM. Il bénéficie des financements de l’Association de la Recherche contre le cancer (ARC) et de la Ligue contre le cancer.
Une offre de sujet de thèse sera bientôt disponible sur le site de l’ED GGC.
Tout candidat intéressé pour un stage post-doctoral peut contacter K. Marheineke.
Publications récentes
- Despras, E., Daboussi, F., Hyrien, O., Marheineke K., Kannouche, PL. (2010) ATR/Chk1 pathway is essential for resumption of DNA synthesis and cell survival in UV-irradiated XP variant cells. Hum Mol Genet, 19 (9) 1690-701.
- Krude, T., Gardiner, T., Hyrien, O., Marheineke, K. (2009) Non-coding human Y RNAs are required for the establishment, but not the elongation of chromosomal DNA replication forks. J Cell Science, 122 (Pt 16) 2836-45.
- Marheineke, K., Goldar, A., Krude, T., Hyrien, O. (2009) Use of DNA combing to study DNA replication in Xenopus and human cell-free systems. Methods in Molecular Biology, DNA replication: Methods and Protocols, 521, 575-603.
- Labit, H., Perewoska, I, Germe, T., Hyrien O., Marheineke K. (2008) DNA replication timing is deterministic at the level of chromosomal domains but stochastic at the level of replicons in Xenopus egg extracts. Nucleic Acids Res, 36 (17) 5623-34
- Goldar, A., Labi,t H., Marheineke, K., Hyrien, O. (2008) A dynamic stochastic model for DNA replication initiation in early embryos. PLoS ONE, 3 (8).
- Labit H., Goldar, A.,Guilbaud, G., Douarche C., Hyrien O., Marheineke K., (2008) A simple and optimized method of producing silanized surfaces for FISH and replication mapping on combed DNA fibers. BioTechniques, 45, 649-658.
- Teer, JK., Machida, YJ., Labit, H., Novac, O., Hyrien, O., Marheineke K., Zannis-Hadjopopoulos M., Dutta, A. (2006) Low levels of Orc2 in human cells decrease pre-RC formation and result in a G1 cdk activation defect. J Biol Chem, 281, 6253-6260.
- Marheineke, K., Hyrien O., Krude T. (2005) Visualisation of bidirectional initiation of chromosomal DNA replication in a human cell free system. Nucleic Acids Res, 33, 6931-6941.
- Marheineke, K., Hyrien O. (2004) Control of replication origin density and firing time in Xenopus egg extracts : implication of a caffeine-sensitive, ATR dependent checkpoint. J Biol Chem, 279, 28071-28081.
- Hyrien O., Marheineke K. , Goldar A. (2003) Paradoxes of eukaryotic DNA replication: MCM proteins and the random completion problem. Bioessays, 25, 116-125.
- Marheineke, K., Hyrien O. (2001) Aphidicolin triggers a block to replication origin firing in Xenopus egg extracts. J Biol Chem, 276, 17092-17100.
